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產(chǎn)品目錄
產(chǎn)品名稱:

RACE服務(wù)

產(chǎn)品價格:
廠商性質(zhì): 工程商 產(chǎn)品時間: 2020-11-09
獲得cDNA的完整序列對研究基因結(jié)構(gòu)、蛋白質(zhì)表達、基因功能至關(guān)重要。RACE法是通過PCR技術(shù)實現(xiàn)的,無須建立cDNA文庫,可以在很短的時間內(nèi)獲得有價值的信息。
 服務(wù)流程

       1)       總RNA提取

 

       2)       已知序列的驗證:根據(jù)客戶提供的已知序列設(shè)計引物,以總RNA為模板進行RT-PCR擴增,驗證參考序列的存在及方向。

 

       3)       5’和3’RACE

               a)       RNA的去磷酸化處理

 

               b)       RNA的3’末端處理;RNA的5’末端處理

 

               c)       cDNA的合成

 

               d)       5’和3’RACE的PCR反應(yīng)

 

               e)       PCR產(chǎn)物構(gòu)建TA克隆

 

               f)       分別隨機挑取10個克隆進行測序

 

       4)       對獲取的序列進行驗證以驗證獲取的5' RACE或3' RACE序列與已知序列是否連續(xù)存在于同一條cDNA片段上。

 

客戶提供

 

         總RNA量大于10 mg,如果基因的豐度較低或者未知序列較長,請?zhí)峁┍M量多的實驗材料。

 

         已知的參考序列長度≥200 bp。

 

我們提供

 

         構(gòu)建好5’和3’RACE的TA克隆(含20%甘油的LB培養(yǎng)基),裝到PMD18-T載體上;測序圖譜;實驗報告

 

質(zhì)量保證

 

         獲取的5' RACE或3' RACE序列與已知序列連續(xù)存在于同一條cDNA片段上

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